中国水星-应用IMS-IFA和IMS-PCR检测高藻水样中的隐孢子虫

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应用IMS-IFA和IMS-PCR检测高藻水样中的隐孢子虫

2006-6-8

文章摘要：摘要：检测饮用水及其水源中的隐孢子虫对保证饮水安全和预防隐孢子虫病流行有非常重要的意义。本文利用直接向蒸馏水中接种卵囊的方法，对隐孢子虫的IMS-IFA和IMS-PCR方法进行了评估，结果表明，IMS-IFA方法回收率在40%以上，精度满足EPA1623的质控要求； IMS-PCR方法能特异性扩增Cryptosporidium parvum 18s rRNA基因序列中1056bp和435bp目标片段，巢式PCR的检测灵敏度为10个卵囊。利用IMS-IFA和IMS-PCR方法分别对接种有卵囊的高藻水样进行检测，试验发现，有几种藻细胞对IMS-IFA干扰严重，从而大大增加了显微镜检确认的难度；而IMS-PCR方法能从高藻水样中检出低密度卵囊，藻细胞没有导致假阳性，也没有出现PCR被抑制的现象；并且IMS-IFA和IMS-PCR两种方法的检测结果有较好的相关性；由此说明，IMS-PCR方法更适合用于高藻水样中隐孢子虫的检测。关键词：隐孢子虫、卵囊、回收率、免疫磁珠分离、免疫荧光分析、巢式PCR

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